布雷非德菌素A Brefeldin A BFA(蛋白转运抑制剂)
基本描述:
细胞因子(Cytokines)表达水平高低直接反映细胞在特异性刺激剂(物)下的应答活动,免疫学研究通常使用适当的刺激剂来激活细胞应答,并通过某些药物如莫能霉素(monensin)
或布雷非德菌素A(Brefeldin A,BFA)作用以阻断胞内高尔基体介导的蛋白转运,促使细胞因子累积,提高细胞因子的胞内信号,从而能借助流式分选技术(FACS)检测细胞因子的表达水平。细胞因子表达具有自身的特征性。
常见的蛋白转运抑制剂:
1、 Monensin莫能霉素,CAS:22373-78-0
简单描述:天然离子载体(ionophore),选择性结合单价阳离子如Li+、Na+、K+、Rb+、Ag+和Tl+,并将这些阳离子转运到细胞膜内。可破坏高尔基体,抑制细胞内的蛋白转运,常用作蛋白转运抑制剂,用于抑制细胞因子等分泌型蛋白的分泌,使其保留在细胞内。
2、 Brefeldin A(BFA,布雷非德菌素A),CAS:20350-15-6
简单描述:一种常用的蛋白转运抑制剂,特异性地可逆地阻断蛋白质从内质网(ER)转运到高尔基体(Golgi)。经BFA处理,高尔基体很快被破坏并融合到内质网上,该过程呈现能量、温度和微管依赖性。BFA是一种真菌代谢物,最初曾用作抗病毒试剂,现主要用于研究蛋白转运。BFA也常被用于抑制细胞因子等蛋白的分泌,并用于增强分泌蛋白的免疫染色检测。BFA可激活神经鞘磷脂循环(sphingomyelin cycle),还可诱导一些肿瘤细胞发生凋亡。
一些应用实例:
细胞因子 | 克隆号 | 靶向细胞 | 刺激物 | 刺激时间 | 蛋白转运抑制剂 | 表面标志蛋白 |
IL-2 | JES6-5H4 | Splenocytes | PMA (20 ng/ml) plus ionomycin (1μg/ml) | 4-6 h | monensin or brefeldin A | CD3 |
IL-3 | MP2-8F8 | Purified CD4+ T cells stimulated with immobilized anti-CD3 (10 μg/ml) + soluble anti-CD28 (2 μg/ml) + IL-2 (20 ng/ml) + IL-4 (50 ng/ml) for 2 days, wash and then culture in IL-2 + IL-4 for 3-4 days | PMA (20 ng/ml) Plus ionomycin (1μg/ml) | 4-6 h | monensin or brefeldin A | CD4 |
GM-CSF | MP1-22E9 | Splenocytes stimulated with immobilized anti-CD3 (10 μg/ml) + soluble anti-CD28 (2 μg/ml) for 2 days, wash and then culture in IL-2 (20 ng/ml) + IL-4 (50 ng/ml) for 3-4 day | PMA (20 ng/ml) plus ionomycin (1 μg/ml) | 4-6 h | monensin or brefeldin A | CD3 |
IFN-γ | XMG1.2 | Splenocytes | PMA (20 ng/ml) plus ionomycin (1 μg/ml) | 4-6 h | monensin or brefeldin A | CD3 |
订购信息:
产品编号 | 产品名称 | 包装规格 |
100mg | ||
1ml | ||
5mg | ||
25mg | ||
200μl | ||
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