Hoechst 33342 染色液（即用型，10μg/ml）

Hoechst 33342 staining solution (ready-to-use, 10 μg/ml)
 

 温馨提示：见我司整理的细胞核（Cell Nuclear）荧光探针产品专题。

产品简介：

Hoechst染料是用于显微观察标记DNA的荧光染料，常用于细胞核和线粒体显像。Hoechst 33258和Hoechst 33342是两种常用染料，均在350nm激发，461nm处发射蓝/青色荧光。Hoechst 33342因含乙基，亲脂性更强，能更好透过细胞膜，而Hoechst 33258在某些细胞中渗透性较弱。它们可用于活细胞或固定化细胞，常代替DAPI等核酸染料。此外，Hoechst染料还能检测样品DNA含量，通过绘制标准曲线分析。Hoechst 33342常用于细胞凋亡检测，染色后可通过荧光显微镜或流式细胞仪检测，激发和发射波长分别为350nm和460nm，嵌入双链DNA后释放强烈蓝色荧光。

本品为即用型的Hoechst 33342染色液（10μg/ml），可直接用于固定细胞或组织的核染色，也可直接用于活细胞或组织的核染色。

保存条件：

-20℃避光保存（两年有效）

使用方法（适用于大多数细胞）： 

一．对于固定的细胞或组织：

1．对于细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色，则先进行免疫荧光染色，染色完毕后再按后续步骤进行 Hoechst 33342 染色。如果不需要进行其它染色，则直接进行后续的 Hoechst 33342 染色。

2．对于贴壁细胞或组织切片，可以在盖玻片上或细胞培养板中原位染色，加入少量 Hoechst 33342 染色液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞，至少加入待染色样品体积3倍的染色液，并混匀。室温放置 3-5分钟。

3．吸除Hoechst 33342染色液，用TBST 、PBS 或生理盐水洗涤2-3次，每次3-5 分钟。

4．直接在荧光显微镜下或封片后荧光显微镜下观察。观察细胞凋亡时，会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染。

二．对于活细胞或组织：

1．加入适当量 Hoechst 33342 染色液，必须充分覆盖待染色的样品，通常对于6孔板，一个孔需加入1ml 染色液，对于96孔板每一个孔需加入100ul 染色液。

2．在适宜于细胞培养的温度培养20-30分钟。弃染色液，用PBS或培养液洗涤2-3次即可进行荧光检测。

注意事项：

1.      荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。

2.      为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液（Cat No.：NBS0032）。

3.      Hoechst 33342 对人体有一定刺激性，为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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