DiOC6(3) 内质网荧光探针

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产品简介：

DiOC6(3)，英文全名3,3'-Dihexyloxacarbocyanine Iodide，CAS NO. 53213-82-4，是一种具细胞膜渗透性、发绿色荧光的亲脂性染料。作为一种膜探针，DiOC6(3)在高浓度下能对活细胞和固定细胞的内质网（高尔基体）染色，也能对囊泡膜和线粒体染色。而在更低浓度下，偏向选择性染色线粒体。DiOC6(3)能用来标记活细胞，然而，由于光动力学毒性会快速破损，经其标记的细胞仅能短时间暴露在光下。神经元和酵母细胞中，DiOC6(3)曾用来研究内质网（ER）结构的相互作用和动力学；当染料浓度提高或在某些呼吸缺陷的酵母菌株内，DiOC6(3)能特异性染酵母核膜，而且具足够灵敏性来揭式核膜（已知称为karmellae）的变化。

产品特性：

1）  CAS NO.：53213-82-4

2）  化学名：Benzoxazolium, 3-hexyl-2-(3-(3-hexyl-2(3H)-benzoxazolylidene)-1-propenyl)-, iodide

3）  同义名：3,3'-Dihexyloxacarbocyanine Iodide; DiOC6(3) Iodide;

4）  分子式：C29H37IN2O2

5）  分子量：572.52

6）  纯度：≥97%（HPLC）

7）  Ex/Em：484/501nm（in methanol）

8）  外观：红色粉末或块状

9）  溶解性：溶于DMSO，DMF，无水乙醇，微溶于水

10）化学结构图：

保存条件: 

-20℃避光干燥保存，至少一年有效。

产品使用：

【注意】以下使用方法仅用作参考，可根据具体的实验条件和具体的应用来做出调整。

1. 染色液制备

1） 储存液制备：用 DMSO或无水乙醇配置浓度1～5 mM的储存液。例如，取10mg DiOC6(3)（Mw：572.52 g/mol）溶于3.49ml 无水DMSO中，充分溶解，即得到5mM的储存液。【注意】未使用的储存液分装储存在-20℃，避免反复冻融，且要避光保存。

2）工作液制备：用合适的缓冲液（如：无血清培养基，HBSS或PBS）稀释储存液，调整到1～5 μM的工作浓度。【注意】：工作液最终浓度需要根据不同细胞系和实验体系来优化。建议从推荐浓度开始，以10倍范围为区间进行最优浓度的摸索。

2. 悬浮细胞染色

1）加入适当体积的染色工作液重悬细胞，使其密度为1×10⁶/mL。

2）37℃孵育细胞2～20min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间，之后优化以保证得到均一化的标记结果。

3）孵育结束，按1000～1500 rpm离心5min。

4）去除上清液，之后轻柔加入37℃预热的生长培养液重悬细胞。

5）再重复3），4）步骤两次。

3. 贴壁细胞染色

1）将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。

2）从培养基中移走盖玻片，滤掉过量培养液，将盖玻片放在潮湿的小室内。

3）在盖玻片的一角加入100μL的染色工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。

4）37℃孵育细胞2～20min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间，之后优化以保证得到均一化的标记结果。

5）吸掉染色工作液，用培养液洗盖玻片2～3次，每次用预温的培养基覆盖所有细胞，孵育5～10min，然后吸走培养基。

注意事项：

1.      荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

2.      为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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