Dihydroethidium (DHE) 二氢乙锭 超氧化物阴离子荧光探针

产品简介：

二氢乙锭（Dihydroethidium，DHE），也称为Hydroethidine，是一种最常用的超氧化物阴离子荧光检测探针。DHE本身是一种细胞膜渗透性的蓝色探针（λ Ex/λ Em: 370/420nm），一旦进入细胞后与超氧化物阴离子反应，生成2-hydroxyethidium。2-hydroxyethidium插入核酸后产生红色荧光（λ Ex/λ Em: 535/610 nm），能够被荧光显微镜、流式细胞仪或其他合适仪器检测。作为一种选择性且灵敏的荧光探针，DHE能用来检测吞噬细胞呼吸爆发中的活性氧（ROS）水平，也能用来检测培养细胞中的超氧化物阴离子水平。DHE也能用作活体染料，流式检测中用于完整细胞的成像和功能分析。还能用在各种凋亡模型中观察荧光的增强。另外，DHE也能用于活细胞线粒体超氧化物生成的检测，虽然其结构类似物MitoSOX Red具有更加特异性的线粒体定位能力。通常情况30~40min内能得到均匀标记的细胞。

产品特性：

1）CAS NO.：104821-25-2

2）化学名：5-ethyl-5,6-dihydro-6-phenyl-3,8-phenanthridinediamine，3,8-Diamino-5,6-dihydro-5-ethyl-6- phenylphenanthridine，2,7-Diamino-10-ethyl-9-phenyl-9,10-dihydrophenanthridine

3）同义名：Hydroethidine，Hydroethidium,，PD-MY 003

4）分子式：C21H21N3

5）分子量：315.41

6）纯度：≥98%

7）Ex/Em：370/420nm（活细胞细胞质内荧光检测）；535/610nm（活细胞染色质荧光检测）

8）溶解性：溶于DMSO（10mg/ml），DMF，无水乙醇和氯仿（20 mg/ml）

9）化学结构图：

保存条件: 

-20ºC避光干燥保存，至少1年有效。

产品使用：

1. 工作液的配制

本品以粉末形式提供，使用前需要经过短暂离心，用高纯度的DMSO制备成5~10 mM储液。分装后避光冻存于-20℃。使用前用缓冲液（PBS/ HBSS/ HEPES）稀释母液至所需工作浓度，通常5~20 μM就可以满足实验需求，具体的浓度要根据实验需要进行进一步的调整。
2. 染色
  将细胞和染色液按照1:1的比例进行混合（例如，100 μL的细胞悬液加入100 μL的染色工作液），室温或37℃孵育60 min。
3. 荧光显微镜观察
  二氢乙锭本身为蓝色荧光，最大激发波长为370 nm，最大发射波长为420 nm，脱氢后与RNA或DNA结合产生红色荧光，最大激发波长为300 nm，最大发射波长为610 nm，实际观察时也可以使用518 nm作为激发波长。

注意事项：

1.      本品易氧化，保存过程中尽量避免接触空气。需保存在氮气或氩气下，特别是溶液。

2.      本品对光敏感，保存和操作过程中注意避光。

3.      本品氧化后产生一定乙锭类化合物，毒性较大，请注意防护。

4.      为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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