Filipin Complex, ≥95% 菲律宾菌素复合物

产品简介：

菲律宾菌素复合物（Filipin Complex）最早是分离自菲律宾链霉菌（S. filipinensis）培养物的一种多烯大环内酯类抗生素和抗真菌药物，具8种异构体成分，其中菲律宾菌素 III（Filipin III）为主要组分。菲律宾菌素复合物（135 µg/ml）抑制酿酒酵母的细胞生长和线粒体末端电子传递。水溶新溶液和真菌细胞膜上，菲律宾菌素复合物（50 µg/ml）与各种固醇结合，特别是24α-甲基胆固醇、24α-乙基胆固醇和胆固醇，诱导纹孔膜生成和细胞内含物泄露。菲律宾菌素复合物是荧光化合物，能标记生物结构的固醇用于成像分析，最大激发和发射波长分别是338和480nm。

产品特性：

1）CAS NO.：11078-21-0

2）同义名：U-5956

3）分子式：C35H58O11(for Filipin III)

4）分子量：654.8

5）纯度：≥70%（MX5214A）；≥95%（MX5214B）；

6）外观：固体

7）溶解性：溶于DMSO、DMF、乙醇、甲醇

8）化学结构图：

保存条件: 

-20℃避光干燥保存，至少2年有效。

产品使用：

以下是针对细胞样本的染色方法，仅作参考。用户需根据实际染色样本和染色条件来优化。

1、储存液的制备

将低温保存的固体平衡至室温至少20min，低速离心后，于无菌工作台内加入适量有机溶剂（比如：无水高质量DMSO）配置成10mg/ml的储存液。

2、工作液的制备

于正式实验前，用PBS、HBSS或其他生理缓冲液稀释储存液，到所需的工作浓度，比如：10-100μg/ml。最佳的工作浓度请参阅文献或自行设置梯度浓度进行摸索。工作液必须现配现用。

3、染色步骤（室温进行）

应用示例（来自文献，仅做参考）

1）用Filipin 进行细胞染色，步骤如下：j用DMSO溶解Filipin制备25mg/ml储存液，分装成小份，置于-20℃密封保存后置于干燥盒内。每次小样使用后即丢弃，不可再次冻存。k用生理盐清洗细胞，用1.5%多聚甲醛固定细胞；l用生理盐再次清洗；m用生理盐稀释Filipin制备成50μg/ml Filipin，室温孵育45min；n用生理盐清洗细胞3次；o用360/40nm激发和480/40nm发射滤片并带365nm二色向长带通滤片进行成像分析（其他相似的UV滤片也可以）。

2）用Filipin染色检测胆固醇再分布和外流。精子悬液离心后去除培养液，之后立即用溶于PBS的4%多聚甲醛固定30min。清洗2次后，用稀释于PBS的Filipin重悬（工作浓度：83μg/ml），室温标记1h，轻轻震荡，且避光。清洗细胞去除多余Filipin，之后重悬于含0.05% NaN3的PBS中用于短期保存。样本保存在4℃（＜1周），用于后续的成像分析或流式评估。流式分析，用UV激发器（355nm）和550/40nm宽带通滤片来检测荧光；成像分析，染色后的精子置于盖玻片上，风干后，用Prolong Diamond抗荧光封片剂减缓荧光漂白，之后用安装有UV滤片组（360/20nm宽带通激发滤片，400nm二向色镜和425nm长带通发射滤片）的荧光显微镜观察。

注意事项：

1.      为了让化合物更好的溶解，可通过37℃加热或（和）超声波水浴中震动片刻来处理。若实验所需浓度过大甚至达产品溶解极限，请添加助溶剂助溶或自行调整浓度。

2.      菲律宾菌素复合物与胆固醇的相互作用会改变吸收和荧光光谱，为此，在做荧光显微镜成像分析时，使用340-380nm作为激发波长，385-470nm作为发射波长。

3.      菲律宾菌素复合物的结合破坏脂质双分子层结构，因此，不适合用于活细胞染色。

4.      菲律宾菌素复合物的荧光染色漂白非常迅速，因此，染色后样本务必尽快分析。

5.      菲律宾菌素复合物溶液对光和空气都非常敏感。条件允许的话，配置好的溶液分装冻存，且充入惰性气体，-80℃分装冻存，避免反复冻融。

6.      为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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