Nile Red 尼罗红

产品简介：

尼罗红（Nile Red），是一种脂质探针（lipophilic probe），能用于定位和定量细胞内的脂质，特别是中性脂滴。作为一种环境敏感型荧光探针，尼罗红在水和其他极性溶剂中基本无荧光，但在非极性环境中发生显著的荧光增强和吸光/发射光谱蓝移（Ex/Em ~552/636 nm，甲醇溶液），可用荧光显微镜或流式细胞仪检测。流式细胞术对尼罗红（单一染色）和尼罗红/抗CD3单克隆抗体（双标染色）的检测方法可用来监测外周血白细胞和淋巴细胞磷脂沉积（PLD）。

产品特性：

1）CAS NO：7385-67-3

2）化学名：9-(Diethylamino)-5H-benzo[a]phenoxazin-5-one 9-(二乙胺基)-5H-苯并[a]吩恶嗪-5-酮

3）同义名：Nile blue A oxazone尼罗丝

4）分子式：C20H18N2O2

5）分子量：318.37g/mol

6）外观：浅绿色至棕色粉末

7）纯度：>95%（HPLC）

8）溶解性：溶于甲醇、乙醇、DMSO

9） Ex/Em：552/636 nm（in metahnol）

10）化学结构图：

保存条件: 

室温避光保存，可置于2-8 ºC长期保存，至少1年有效。

产品使用：

一、 工作液制备

1）母液准备：取适量的尼罗红（MW：318.37g/mol）用无水DMSO充分溶解制备1mM储存液，按照单次用量分装冻存，避免反复冻融，避光保存。

2）工作液准备：用HHBS或生理缓冲液，pH 7将母液按1:1000稀释为1×尼罗红工作液，漩涡混匀。

【注1】：尼罗红的实际染色浓度请参考文献或实验室体系来调整。以上只做参考。

二、 染色步骤

1）用检测化合物处理细胞一段时间。

2）离心并调整细胞浓度为1-5×10⁵cell/管。

3）用500µl尼罗红工作液重悬细胞。

4）室温或37ºC避光孵育5-10min。

5）吸掉染色工作液，用HHBS或适当缓冲液清洗细胞。

6）用500µl预热的HHBS或培养基重悬细胞，使细胞密度为1-5×10⁵cell/管。

7）荧光显微镜或流式细胞仪检测荧光信号，Ex/Em = 552/636 nm。

【注1】：对于贴壁细胞，可用HHBS或适当缓冲液清洗细胞，然后直接加入尼罗红工作液孵育。

【注2】：细胞也可预固定，然后用尼罗红工作液染色。

注意事项：

1.      为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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