C-Laurdan 脂膜荧光探针

产品简介：

6-十二烷酰基-2-[N-甲基-N-(羧甲基)氨基]萘（6-dodecanoyl-2-[N-methyl-N

-(carboxymethyl)amino]naphthalene,C-laurdan），是广泛使用的脂膜荧光探针Laurdan（NBS5115-5mg）的羧基衍生物，与母本化合物相比，对膜极性具更高的灵敏度，更明亮的双光子荧光成像，且更准确的反映细胞环境。

C-laurdan携带的羧基基团发生局部离子化，赋予探针更好的水溶性和快速插入膜内。作为一款极性敏感的脂膜探针，适用于脂筏（Lipid rafts）成像和细胞膜成像。应用于膜极性的单光子和双光子荧光成像。

产品特性：

1）CAS NO.：959839-06-6

2）化学名：N-Methyl-N-[6-(1-oxododecyl)-2-naphthalenyl]glycine

3）分子式：C25H35NO3

4）分子量：397.56

5）纯度：≥95%

6）外观：固体

7）溶解性：溶于DMF (100mM)、DMSO（20mM）、乙醇（10mM）

8）荧光：λex/ λem =348/423 nm

【注意】：双光子激发光谱=780nm。单光子最大激发和发射波长分别是：348nm和423nm。

9）化学结构图：

保存条件: 

-20ºC避光干燥延长保存，2年有效。 

产品使用：

一、 储存液制备

将低温保存的C-Laurdan（Mw: 397.56）置于室温回温至少20min，低速离心后加入一定量的DMF或DMSO配制成适量浓度的母液，比如20mM（往2mg粉末加入251 µl DMSO，充分溶解即可）。根据单次用量将储存液分装，≤-20℃避光干燥保存（-20℃ 1-2个月内使用；-80℃保存3-6个月内使用）。需注意溶液内湿度的逐渐积累会随着时间引起探针聚集，从而务必干燥保存储存液。

二、 染色工作液制备

用HHBS、HBSS、不含血清的基础培养基或无血清培养基等稀释C-Laurdan储存液到适宜的工作浓度，比如：5-50µM。最佳的工作浓度需自行优化。染色工作液需现配现用。

三、应用示例（来自文献，仅做参考）

文献1：

实验目的：C-Laurdan用来观察膜重组（Membrane organization）。

实验方法：染色流程：a）HUVECs细胞爬片接种在4孔板内，用1：1000的CpdG或DMSO处理24h。b）成像前，去除旧培养基，更换不含FBS的EGCM2培养基，加入C-Laurdan染料使其工作浓度为5μM，加载30min。c）细胞用PBS清洗2次，用4% PFA室温固定10min。d）吸走PFA，细胞用PBS清洗2次。d）盖玻片封片。用Leica Stellaris 8 Falcon/DLS倒置荧光显微镜进行成像。使用405nm激发光源，发射光谱分别是415-460nm和470-530nm。用ImageJ软件计算广谱偏振（GP）。

文献2）Ballweg, S., Sezgin, E., Doktorova, M. et al. Regulation of lipid saturation without sensing membrane fluidity. Nat Commun 11, 756 (2020). //doi.org/10.1038/s41467-020-14528-1

实验目的：C-Laurdan用来测定脂质包装（Lipid packing）。

实验方法：染色流程：333.3 µM脂质与稀释于150µl 50mMHEPES pH 7.4, 150 mM NaCl, 5 %(w/v) 甘油的0.4 µM C-Laurdan混合。样本用375nm激发，记录从400-600nm的发射光谱。空白校正的话，使用不含C-Laurdan的样品记录相同范围内的光谱。GP值（理论范围从+1（基本有序）到-1（基本无序），通过测定400-460nm（ICh1）和470-530nm（ICh2）范围内的荧光强度来计算。

注意事项：

1.      荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

2.      为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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