TTC 红四氮唑（2,3,5-氯化三苯基四氮唑）

产品简介：

2,3,5-氯化三苯基四氮唑，又称四唑红，简称TTC，TTZ，或TPTZ，一种脂溶性光敏感复合物，既可用来检测种子的生存能力，也可用来检测哺乳动物组织的缺血梗塞。检测机制在于TTC本身可作为一种氧化还原指示剂，活细胞内的脱氢酶（尤其是线粒体内的琥珀酸脱氢酶）可以将TTC还原为红色甲臢化合物TPF（1,3,5-triphenylformazan）。对于种子或者植物组织来说，染色结果为活组织被染成不同程度的红色，死组织或者无生命力的组织不着色。对于缺血梗塞组织，因组织坏死脱氢酶活力丧失呈现苍白色，而正常组织呈深红色。TTC常用的染色浓度为2%（w/v），也可根据组织类型做浓度的适当调整。

产品特性：

1）CAS NO：298-96-4

2）同义名：2,3,5,Triphenyl-2H-Tetrazolium Chloride 2,3,5-三苯基-2H-四唑盐酸盐；2,3,5-Triphenyltetrazolium Chloride 2,3,5-氯化三苯基四氮唑；Tetrazolium red红四氮唑，红四唑，四氮唑红；TPTZ；TTZ；

3）分子式：C19H15ClN4

4）分子量：334.8g/mol

5）外观：类白色至浅黄色结晶

6）纯度：>98%

7）溶解性：溶于水（10mg/ml），乙醇（10mg/ml）和丙酮，不溶于乙醚

8）化学结构图：

保存条件: 

2-8℃避光干燥保存，3年有效。

产品应用：

1）用于植物根系活力测定；

定性检测方法：1% TTC溶液：0.4M琥珀酸：磷酸缓冲液=1:5:4混合，浸没根部，37℃暗处孵育1-3h，观察着色情况。结果：新根尖端或细侧根明显变为红色，表明这些部位有脱氢酶存在，有细胞代谢活力。

2）用作种子活力测定；

定性检测方法：0.5%TTC溶液，浸没剥去种皮（勿伤害种胚）的种子，恒温箱（30-35℃）暗处孵育0.5-1h左右。染色结束，倒去TTC溶液，用清水清洗种子1-2次，观察种胚染色情况。结果：凡种胚全部或大部分被染红色即为有活力种子，不被染色的为死种子。

3）用作花粉活力测定；

定性检测方法：0.5%TTC溶液；将花粉取少许置于干净载玻片上，加1-2滴0.5%TTC溶液，搅匀后盖上盖玻片，以清水为对照，37℃恒温箱暗处孵育0.5h左右，镜检。结果：花粉死亡不能被染色；花粉生命力衰退或部分丧失则染色较浅或局部被染色；根据花粉染色的深浅程度来鉴定花粉的生命力。

4）用作微生物生长测定；

定性检测方法：1%无菌TTC溶液；预热到50℃左右，按照取1ml 1%TTC溶液到100ml冷却到50-60℃的固体/液体培养基比例来使用。可用于大肠型细菌的计数和鉴定。

产品使用：(仅供参考)

1.1染色工作液的配制
TTC通常用磷酸缓冲盐溶液来配制，pH范围为6.5-7.5之间，常用的工作浓度为2%，也可用1%或者更低的浓度，根据自身实验体系调整。

可使用以下的缓冲盐体系配制：

1）取9.078 g KH₂PO₄（MW：136.09）溶于1L去离子水内，制备成66.7 mM KH₂PO₄储存液；取9.472 g Na₂HPO₄·H₂O（Mw：137.99）溶于1 L去离子水内，制备成68.6 mM Na₂HPO₄储存液；将两份KH₂PO₄储存液与1份Na₂HPO₄储存液充分混合，即得到需要的磷酸缓冲液溶液。

2）根据需要的TTC工作液浓度来制备，如加入2 g TTC粉末到100 mL混合的磷酸盐缓冲液中，即得到2%的染色工作液。此时的溶液pH值在6.5-7.5之间。此工作液可装到不透明的白色瓶或者棕色瓶子内，4°C保存几个月稳定。

【注意：TTC染色液的缓冲体系可根据自己的实验习惯来调整；也可用去离子水来溶解配置成10 mg/mL的储存液，过滤除菌，建议此法染色液当天使用。】
1.2染色方法（动物组织）
1）取新鲜组织切片放到装有TTC染色液的染色容器内，37℃避光孵育15-30 min，边孵育边观察颜色变化；【注意：TTC染色液可重复使用2-3次，可将用过的TTC染色液放到新的容器内继续使用。】

2）【可选】轻柔的吸取缓冲液（如1×PBS）将组织表面多余的染色液冲洗掉；

3）此时即可观察或者拍照。若需长久保存，用4%多聚甲醛溶液（货号：NBS0135）固定10-20 min。

注意事项：

1.      本品具有微量的光和热敏感性，使用以及存放的过程中避免长时间曝光或者接触到过高温度下。

2.      为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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