革兰氏染色试剂盒

Gram Stain Kit for Microscopy

产品简介：

革兰氏染色法（Gram Stain）是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，于1884年由丹麦医生Christain Gram所创立。由于未经染色的细菌与周围环境折光率差别甚小，在显微镜下极难观察。而经染色后的细菌与环境形成鲜明对比，能清楚观察到细菌形态、排列及某些结构特征，则可用来鉴别细菌，把众多细菌分为两个大类：革兰氏阳性菌（G+）和革兰氏阴性菌（G-）。染色原理在于：首先，细菌经初染液（结晶紫）初染成蓝紫色，再加媒染液与结晶紫结合成结晶紫-碘的复合物，增强了染料与细菌的结合力。革兰氏阳性细菌的细胞壁主要由肽聚糖形成的网状结构组成，壁厚、类脂含量低，当用脱色液脱色时细胞壁脱水、使肽聚糖层的网状结构孔径缩小，透性降低，从而使结晶紫-碘的复合物不易被洗脱而保留在细胞内，经脱色和复染液复染后仍保留初染时的蓝紫色。然而，革兰氏阴性菌（G-）的细胞壁类脂含量多，肽聚糖层较薄且肽聚糖为平面片层结构，易被脱色液溶解，使细胞壁通透性增高，结合的结晶紫-碘染料复合物容易泄漏，细菌被脱色为无色，再被复染液复染成红色。

本革兰氏染色试剂盒（Gram Stain Kit for Microscopy ）在经典的革兰氏染色配方基础上做了进一步优化，染色效果得以明显增强，对极难染色细菌都有良好的染色表现。染色背景干净，胞浆和胞质对比强烈，胞内吞噬体也可清晰辨认，细菌染色特征典型。操作简便，方法可靠。

保存条件: 

室温保存，1年有效。 

产品组成：

产品使用：（适用于细菌等微生物的涂片样本）

自备材料：

1. 接种环或挑取细菌的其他工具

2. 酒精灯

3. 载玻片

4. 光学显微镜

染色方法：

1. 涂片：取待检细菌，于载玻片中央涂成一薄层，或者在载玻片上滴加少许无菌水，取菌与水混合均匀，涂成一薄层。

【注意】：涂片之前，请事先在背面做好圆圈标记，以便于判断后续试验的位置。

2. 干燥：涂片后在室温下自然干燥，也可在酒精灯上略加温，使其迅速干燥。

3. 固定：手持载玻片一端，标本面朝上，在酒精灯的火焰外侧快速来回移动3~5次，每次1s，温度不宜过高，防止菌体蛋白变性，放置待凉后染色。也可用甲醇或乙醇固定。

【注意】：加热固定涂片时，请注意玻片不要太靠近火焰。一般要求玻片温度不超过60℃，以玻片背面触及手背皮肤不觉过烫为宜。

4. 初染：滴加初染液染色1~2min，之后清水冲洗掉染色液。

5. 媒染：滴加媒染液，并覆盖载玻片，室温放置1~2min，之后水洗。

6. 脱色：滴加脱色液，摇动10~30s，直至流下的脱色液不出现紫色时为止，立即用水冲洗掉脱色液来终止反应。

7. 复染：滴加复染液染色30~60s，之后水洗、待干。

8. 镜检：置油镜观察。

染色结果：

注意事项：

1.      取细菌时应要注意自我防护，拔出和塞进试管塞的时候，应将试管口通过火焰略微烧灼，最后将接种环在火焰上烧灼灭菌。

2.      革兰氏染色的关键在于严格掌握脱色程度，脱色时间应根据经验判断。脱色过度，阳性菌可被误染为阴性菌；脱色不够，阴性菌可被误染为阳性菌。

3.      待检细菌培养时间会影响染色，阳性菌培养时间过长或已死亡或细菌溶解，常呈阴性。

4.      为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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