Coumarin Boronic Acid (CBA) (ONOO- Fluorescent Probe) 香豆素硼酸

产品简介：

香豆素硼酸（Coumarin Boronic Acid, CBA），是一款荧光探针，用来检测过氧亚硝基（ONOO-）、次氯酸（HClO）和过氧化氢（H2O2）[1-3]。香豆素硼酸与过氧亚硝基的反应指数级速度（k = 1.1 μM/s）快于过氧化氢（k =1.5 M/s），适当速度快于次氯酸。过氧亚硝基氧化香豆素硼酸生成荧光产物-7-羟基香豆素（COH），最大激发和发射波长分别是332nm和470nm。

产品特征：

1）同义名：CBA; coumarin-7-boronic acid; (2-Oxochromen-7-yl)boronic acid;香豆素-7-硼酸；

2）化学名：B-(2-oxo-2H-1-benzopyran-7-yl)-boronic acid

3）CAS NO.：1357078-03-5

4）分子式：C9H7BO4

5）分子量：189.96

6）外观：固体

7）纯度：≥95%

8）溶解性：溶于DMSO（3mg/ml）、乙醇（1mg/ml）、DMF（10mg/ml），DMSO:PBS (pH 7.2) (1:1) (0.5mg/ml)

9）化学结构图：

保存条件: 

-20℃避光干燥保存，至少2年有效。

产品使用：（来自文献，仅作参考）

用CBA测定巨噬细胞光敏氧化后蛋白过氧化氢（H₂O₂）的生成水平

方法如下：RAW 264.7细胞用HBSS清洗后，加入含5μM 孟加拉玫瑰红的HBSS于37℃避光孵育30min。细胞用HBSS清洗两次后，更换成新鲜的HBSS。之后将细胞置于冰上，暴露于可见光下（100w白炽灯）光照高达60min。光照结束后立即加入过氧化氢酶（580 units/ml），室温孵育2min。细胞用DPBS清洗后，用1ml DPBS刮下来转移到离心管，离心后，清楚上清液，细胞沉淀用液氮冷冻，之后保存在-80℃。细胞沉淀重悬后，用含DTPA（0.1mM）和过氧化氢酶（100units/ml）的水裂解。制备好的细胞裂解物转到96孔板，用含DTPA（0.1mM）、过氧化氢酶（100units/ml）和CBA（0.8mM）的磷酸缓冲液（50mM, pH 7.4）混匀。样本置于时未能孵育2h，之后在荧光酶标仪中测定生成的COH。

注意事项：

1.      为了让化合物更好的溶解，可通过37℃加热或（和）超声波水浴中震动片刻来处理。若实验所需浓度过大甚至达产品溶解极限，请添加助溶剂助溶或自行调整浓度。

2.      为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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