X-α-gal 5-溴-4-氯-3-吲哚基-α-D-吡喃半乳糖苷

产品简介：

X-α-Gal（5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-吡喃半乳糖苷，CAS：107021-38-5），一种用来检测α-半乳糖苷酶（也称为蜜二糖酶，α-D-半乳糖苷半乳糖水解酶，EC 3.2.1.22）活性的显色底物。X-α-Gal的使用，避开双杂交分析中β-半乳糖苷酶溶液制备和滤膜提升实验（filter-lift assay）的繁琐操作，只需直接添加在培养基上，通过蓝色沉淀的生成与否，即可用来检测双杂交相互作用。X-α-Gal可用来区分肠杆菌科内的不同物种以及划分乳酸菌和双歧杆菌。组织学研究中，X-α-Gal还可借助光学显微镜来检测组织的α-半乳糖苷酶活性。

利用α-半乳糖苷酶水解二糖-蜜二糖作为碳源，酵母菌得以正常生长或进行发酵。酿酒酵母菌内，该酶由几种GAL基因调控的MEL1基因所编码。一旦GAL4激活，α-半乳糖苷酶分泌，之后水解培养基上的X-α-Gal，使得菌落产生蓝斑。酵母双杂交研究用的工程菌包括AH109，PJ69-2A，Y190和Y187。

产品特性：

1）CAS NO：107021-38-5

2）化学名：5-Bromo-4-chloro-3-indoxyl-α-D-galactopyranoside5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-吡喃半乳糖苷；X-α-D-Galactoside X-α-D-半乳糖苷；

3）分子式：C14H15BrClNO6

4）分子量：408.64g/mol

5）纯度：≥98%（TLC）

6）外观：白色或近白色结晶粉末

7）溶解性：溶于DMF（20 mg/ml）

8）化学结构图：

保存条件: 

-20℃避光干燥保存，2年有效。

产品使用：

方法1：直接倒入固体培养基

1. 溶解60mg X-α-gal于3ml DMF得20mg/ml储存液，马上使用或者避光储存于-20℃，6个月稳定；

2. 将高压灭菌好的琼脂培养基于室温冷却至50℃；

3. 按照每升培养基加入1ml 20mg/mlX-α-gal储存液的用量，直接加入冷却好的琼脂培养基；【若有需要，此时也可加入筛选用的抗生素】；

4. 倒平板，使用前必须让培养基室温凝固（通常至少需30min）。

方法2：涂布于预制培养平板上

1. 溶解24mg X-α-gal于6ml DMF得4mg/ml储存液，马上使用或者避光储存于-20℃，6个月稳定；

2. 超净工作台内放置已经倒好的固体培养基，使其表面干燥；

3. 吸取200μl (15cm平板) 或100μl（10cm平板）4mg/ml X-α-gal 储存液于预制培养平板上，并涂布使其均匀分散在表面【注意：平板边缘通常很难得以充分涂布，可能导致假阳性克隆生成。建议条件可能下，于平板中央挑取克隆】。

4. 使用前将上述涂布好的筛选平板于超净工作台内，至少晾干30min；

5. 将转化好的细菌或酵母涂于平板上，分别置于37℃或30℃倒置培养，直至蓝色菌落出现。

注意事项：

1.      为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。