0.5M TCEP 溶液(pH6.8, Adjusted with NaOH)（NBS0461）
0.5M TCEP 溶液(pH6.8, Adjusted with NaOH)（NBS0461）
货号：NBS0461
规格：10ml
品牌：NoninBio
0.5M TCEP 溶液(pH6.8, Adjusted with NaOH)
0.5M TCEP 溶液(pH6.8, Adjusted with NaOH)
货号：NBS0461
规格：10ml
品牌：NoninBio
TCEP-HCl的化学结构式
产品简介：
TCEP即TCEP-HCl，全称Tris(2-carboxyethyl)phosphine hydrochloride，中文名为三(2-羧乙基)膦盐酸盐。分子式为C9H15O6P·HCl，分子量为286.65，CAS号51805-45-9。本产品为0.5M TCEP溶液，用NaOH调节pH值至6.8，常作为DTT的替代物用于蛋白上样缓冲液和其它还原试剂的配制。在SDS-PAGE电泳中，一般终浓度在25mM左右的TCEP即可足够还原蛋白样品。TCEP使用范围广泛，无论是普通的SDS-PAGE中蛋白的还原，还是一些特殊的实验如固相金属离子亲和层析(IMAC)、质谱、Ni柱纯化等其它需要还原二硫键的实验，也特别适用于组氨酸标记蛋白纯化、马来酰亚胺偶联半胱氨酸残基反应，它能够预防半胱氨酸残基形成二硫键，但不像DTT或β-巯基乙醇本身易与马来酰亚胺反应。
保存条件：
-20℃或4℃保存，至少1年有效。
注意事项：
1. 本产品用于蛋白变性时，建议95℃水浴或PCR仪加热5分钟，温度过高(如100℃)或时间过长(如超过15分钟)，有可能会导致蛋白降解或上样缓冲液中指示剂的颜色异常。
2. 本产品在磷酸盐缓冲液中，尤其在中性或碱性磷酸盐缓冲液中很不稳定。因此若实验过程需将本产品配制在PBS缓冲液中使用，必须现配现用。
3. 大多数蛋白无需变性剂即可高效还原，但加入盐酸胍等变性剂有助于将内部二硫键暴露而易于和TCEP发生反应。
4. 不建议使用尿素作为变性剂，避免形成氰酸酯并与巯基反应。
5. 尽量防止金属接触TCEP溶液，否则会一定程度降低TCEP活性。在还原过程中向样品缓冲液中加入5至20mM EDTA有助于防止巯基被二价金属离子氧化，如Zn2+、Cu2+和Mg2+等。
6. 还原后样品应尽快使用，长时间放置后会重新生成二硫化物。
7. 本产品在溶液中带电荷，因此不适用于等电聚焦(IEF)实验。
8. TCEP对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
9. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
产品使用：
1. 在不含DTT或β-ME的2×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(100mM Tris，20%甘油，4% SDS，0.005%溴酚蓝，pH6.8)中加入本产品， 至TCEP终浓度为50mM，吹打或斡旋混匀。
2. 将等体积的上述2×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液与蛋白提取液加入到新的离心管中并混匀，沸水浴中煮5min。
3. 样品冷却后，在离心机中瞬离，然后取上层溶液进行Western blot实验。
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