产品简介
DSRed是一种灵敏、稳定、安全无毒的核酸染色剂,适用于对琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶中的核酸(dsDNA、ssDNA、RNA)进行染色。DSRed具有高于EB(溴化乙锭)的灵敏性,可以检测到微量的DNA。DSRed通过静电吸引的方式结合核酸分子,在工作浓度下不具有致突变能力,比EB更安全,更环保。
安全性说明:本品具有特殊的分子结构,不能穿过细胞膜和乳胶手套。本品已通过生物安全性测试,在工作浓度下不具有致突变性,且对环境是安全的,可以直接倾倒入下水道。
保存条件
请置于室温避光保存。本品结构稳定,开封后可至少保持十二个月有效。
使用方法
由于核酸分子结合染料后会影响自身在电泳过程中的迁移,同时会导致相邻核酸条带之间互相影响,因此更推荐使用后染法(泡染法)。对于聚丙烯酰胺凝胶,也推荐使用后染法(泡染法)。
1. 凝胶预染法
1.1 按常规方法配制琼脂糖凝胶;
1.2 向融化的琼脂糖中加入适量的DSRed使其终浓度为1×,充分混匀。如50 ml琼脂糖凝胶中加入5 μl 10,000× DSRed;
1.3 向制胶板中倾倒凝胶,使其凝固;
1.4 加样,按照常规方法进行电泳;
1.5 通过凝胶成像系统(302 nm)观察被染色的凝胶,拍照保存。
2. 后染法(泡染法)
2.1 按常规方法进行电泳;
2.2 用纯水将10,000× DSRed原液稀释3,300倍至约3×。如50 ml纯水中加入15 μl 10,000× DSRed;
备注:也可用0.1 M NaCl 稀释10,000× DSRed至3×,可以增加染料灵敏性,但是重复使用易产生沉淀。
2.3 将电泳后的凝胶置于合适的容器中,如聚丙烯材质的容器,再加入适量的3×染色液浸没凝胶;
2.4 室温轻轻振荡染色约30分钟;
备注:染色时间与凝胶厚度及琼脂糖浓度有关。对于3.5%-10%的聚丙稀酰胺凝胶,通常需染色30分钟至1小时。
2.5 用清水将染色的凝胶缓慢冲洗干净;
2.6 通过凝胶成像系统(302 nm)观察被染色的凝胶,拍照保存;
备注:染色液可以重复使用至少2-3次,置于室温避光保存。
注意事项
1. DSRed是大分子核酸染料,难以穿透细胞膜,因而比小分子的溴化乙锭(EtBr,EB)更加安全,但是对DNA迁移的影响也更大。因此,为了避免DNA片段,尤其是多片段的DNA Marker产生条带扭曲或分离异常等现象,jnh官网更推荐建使用后染法来进行染色。
2. DSRed在低温环境下易发生沉淀,因此请置于室温保存。若发生沉淀,可将染料加热至45-50℃,2分钟,振荡溶解。
3.
由于DSRed具有较高的灵敏性,因此建议核酸样品的上样量为50-200 ng/泳道。若未知浓度的样品亮度过高,请降低上样量。
为了适应预染法用户的使用习惯,jnh官网专门开发了适用于大分子核酸染料的DNA分子量标准LD DNA Marker系列。因此,当用户使用DSRed等新型无毒核酸染料预染琼脂糖凝胶时,请搭配东盛生物LD DNA Marker系列。
如下图所示,东盛生物经典版DNA Marker DSTM 5000在DSRed预染的凝胶中条带相互挤压,不能有效分离,而LD DSTM 5000条带可以正常分离。