ACE(南京艾思易)Magneti-G Flag标签免疫沉淀/免疫共沉淀试剂盒
货号:BK0048-01;BK0048-02
规格:10T;50T
品牌:ACE
1.1Magneti-G 商标
Magneti-G 商标来自于磁性(Magnetic)的英文谐音,G 为高聚物的汉语拼音的首字母,因此带有这一商标的产品,均为高聚物材质的磁性微球。这 一 商 标 主 要 用 于 一 系 列 基 于 抗 体 亲 和 方 法 的 标 签 蛋 白 IP 试 剂 盒,目 前 已 有 Anti-His-tag、Anti-Myc-tag、Anti-HA-tag、Anti-DYKDDDDK-tag、Anti-GFP-tag 和 Anti-RFP-tag 六种标签 IP 试剂盒。后续将根据客户的需求,基于 Magneti-G 高聚物磁珠开发更多相关产品。
1.2 DYKDDDDK 标签
DYKDDDDK肽段是融合蛋白表达纯化过程中最常用的标签(tag)之一。它可以连接在融合蛋白的 N 端、C 端或序列中间,具有极好的亲水性,更容易展示在融合蛋白的表面,干扰融合蛋白功能的可能性较小。这一标签还具有一个优势:连接在目的蛋白的N 端时,可以被Enterokinase (EK protease)从序列 C 端赖氨酸的位置切除,而不留下冗余残基。
1.3 Anti-DYKDDDDK 抗体
DYKDDDDK 肽段也经常被称为 Flag 肽段 , 是 Sigma 公司的注册商标。大约四十年前,该公司最早筛选了一系列抗 DYKDDDDK 标签的抗体,分别命名为 Anti-Flag M1,Anti-Flag M2, Anti-Flag M5 等,其中 M2 抗体广泛用于免疫杂交、免疫沉淀、亲和纯化等方向。本公司目前有两株Anti-DYKDDDDK 抗体,亲和力都要高于 Anti-Flag M2 抗体,更适合做 WB、IP 等蛋白互作实验。抗体带有 biotin 修饰的人源化恒定区(hFc),可以被 SA-HRP、SA-RPE 识别,利于更高效的使用化学发光或者荧光方法进行检测。
1.4 试剂盒组分
抗体与对应的标签之间有特异性的结合,将抗体偶联在 Beads 上,就可以把带有对应标签的融合蛋白结合到 Beads 上。经过缓冲液去除杂蛋白等步骤之后,融合蛋白可以使用变性剂或者高温处理等方式从 Beads 上洗脱下来。为方便使用,本试剂盒提供多种试剂方便客户更好的进行蛋白互作实验,具体的组份见表 1。
试剂盒成份 | 名称 | 特征 |
蛋白磁珠 | Magneti-G Anti-DYKDDDDK Beads | 偶联了标签抗体的磁性高聚物微球 |
裂解缓冲液 | IP Lysis Buffer A(5×) | 细胞清洗之后重悬细胞,也可以用来稀释高浓度的去污剂 |
IP Lysis Buffer B | 含有高浓度的去污剂,能够打开细胞膜释放蛋白 | |
洗脱液 | Elution Buffer D | 含有变性剂和离液剂,蛋白失活 |
蛋白上样缓冲液 | SDS Loading Buffer(2×) | 重悬磁珠后高温处理5-10min,能够将目的蛋白煮下来 |
阳性对照 | 红色荧光蛋白(DYKDDDDK标签) | 带有DYKDDDDK标签的红色荧光蛋白 |
名称 | 货号 | 规格 |
Magneti-G DYKDDDDK标签免疫沉淀/共沉淀试剂盒 | BK0048-01 | 10T |
BK0048-02 | 50T |